人脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1elisa試劑盒是一種重要的膜蛋白，它參與了細(xì)胞對(duì)脂肪酸的攝取和代謝。如今，ELISA試劑盒已被廣泛應(yīng)用于FATP1的檢測(cè)和研究。主要原理是利用特異性抗體與待測(cè)樣品中的FATP1結(jié)合，再加入辣根過(guò)氧化物酶-標(biāo)記的二抗，最后通過(guò)底物反應(yīng)顏色變化來(lái)定量檢測(cè)FATP1含量。
1.樣品預(yù)處理：待測(cè)樣品應(yīng)該是清晰的液態(tài)樣品，在收集前加入保護(hù)劑如丙二醇、乙二醇或BSA。可用離心機(jī)去除雜質(zhì)和固體顆粒。
2.樣品稀釋：將樣品按照試劑盒中的建議稀釋，通常情況下，建議將樣品稀釋至100倍以上，以避免高濃度樣品的干擾。
3.添加標(biāo)準(zhǔn)品：取出試劑盒中提供的標(biāo)準(zhǔn)品，并按照說(shuō)明書中的指導(dǎo)進(jìn)行稀釋。將標(biāo)準(zhǔn)品分別加入不同的孔中，作為比較參照。
4.加入檢測(cè)抗體：將試劑盒中提供的檢測(cè)抗體加入到每個(gè)孔中，與有FATP1的標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣品結(jié)合。
5.加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的二抗：將試劑盒中提供的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的二抗加入到每個(gè)孔中，與檢測(cè)抗體結(jié)合。
6.加入TMB底物液：將試劑盒中提供的TMB底物液加入到每個(gè)孔中，這將導(dǎo)致底物分解并產(chǎn)生顏色變化。
7.加入停止溶液：在顏色出現(xiàn)之后，加入停止溶液，停止底物反應(yīng)，并使顏色穩(wěn)定。
8.讀取結(jié)果：在波長(zhǎng)450nm下使用微孔板讀板器或光度計(jì)讀取結(jié)果。
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